EDC/NHS交联方法的使用已经非常成熟了,一般将纳米粒子表面用羧基或氨基功能化处理,海南表面羟基化,之后偶联纳米粒子与抗体上的羧基或氨基,完成抗体的偶联。我们在Thermo Fisher上找到了一般的步骤和注意事项。EDC和Sulfo-NHS在pH 4.5-7.2的水溶液中活化羧基具有佳活性,但Sulfo-NHS活化后的分子与氨基的反应在pH 7-8的水溶液中才具有佳活性。
感受完这种粗糙度之后,2010年就有人把疏水蛋白引入到检测中,材料表面羟基化,改善这种基质表面抗体堆积不均匀的情况。疏水蛋白能够自组装形成10nm厚的两亲性膜,疏水性一侧贴在疏水性的聚板上,表面羟基化方法,亲水性的一侧伸向溶液中,可以物理吸附抗体,用于组装一抗。石英晶体微天平结果显示在pH=5时,聚板上形成一层致密的膜;X射线光电子能谱和水接触角测试显示疏水蛋白修饰后,疏水的聚板能够保持长达3个月的亲水性;原子力显微镜结果显示,连接到疏水蛋白上的抗体也终于站起来了,是一种“end-on”的取向排列。
俄罗斯科学院恩格尔哈得分子生物学研究所和美国阿贡国家实验室(ANL)的科学家们早在文献中提出了用杂交法测定核酸序列(SBH)新技术的想法。当时用的是多聚寡核酸探针。几乎与此同时英国牛津大学生化系的Sourthern等也取得了在载体固定寡核苷酸及杂交法测序的国际。在这些技术储备的基础上,铁表面羟基化,1994年在美国能源部防御研究计划署,俄罗斯科学院和俄罗斯人类基因组计划1000多万美元的资助下研制出了一种生物芯片,并用于检测尽地中海血样的基因突变,筛选了一百多个外已知的突变基因。
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