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表面羟基化原理 表面羟基化 苏州贝蒂克
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这种生物芯片的基因译码速度比传统的Sanger和 Maxax Gilbert法快1000倍,是一种有希望的快速测序方法。1996 年底,美国旧金山AFFYM ATRIX公司 Steven Fodor等充分结合并灵活运用了照相平板印刷、计算机、半导体、激光共聚焦扫描、寡糖苷酸DNA合成、荧光标记探针杂交及分子生物学的其他技术,表面羟基化原理,创造了世界上块 DNA芯片或DNA列阵(DNA chip or DNA arrays),即基因芯片。









二、黏附剂的使用

1.多聚左旋赖氨酸(poly-1-lysine)

首先配制0.1%(ω/υ)多聚左旋赖氨酸浓缩液,室温下(18~26℃)可保存1年。使用时,将试剂10倍稀释成工作液,表面羟基化,浓度为0.01%(ω/υ),2-8℃冰箱保存,有效期3个月。使用方法是将充分洗净和预先干燥的玻片浸泡于稀释后的多聚左旋赖氨酸溶液数十秒或提拉十次,沥干.于室温下晾干12-24小时或在45℃以下烤箱内烘干。处理后的玻片避光干燥可保存三个月。




早在八十年代, Bains W. 等人就将短的 DNA 片断固定到支持物上,羟基化表面处理,借助杂交方式进行序列测定。但基因芯片从实验室走向工业化却是直接得益于探针固相原位合成技术和照相平板印刷技术的有机结合以及激光共聚焦显微技术的引入。它使得合成、固定高密度的数以万计的探针分子切实可行,而且借助基因芯片激光共聚焦显微扫描技术使得可以对杂交信号进行实时、灵敏、准确的检测和分析。产品即将或已有部分投放市场,产生的社会效益和经济效益令人瞻目。




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